Agar ist ein Polymer, das zum Wachstum von Bakterien verwendet wird. Agar wird zuerst als Pulver geliefert und erstarrt, wenn es in kochendem Wasser gelöst und abgekühlt ist, zu einer festen Oberfläche für das bakterielle Wachstum. Es gibt viele verschiedene Arten von Agar, die verwendet werden können, um Ihre Bakterien von Interesse zu werden, abhängig von der Spezies und Ihren Forschungsbedürfnissen. Nähragar ist beliebt, weil es eine Vielzahl von Arten von Bakterien und Pilzen anbauen kann und viele Nährstoffe enthält, die für robustes Bakterienwachstum benötigt werden.
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Inhaltsstoffe des Nähragars
Nähragar enthält 0,5 Prozent Pepton, ein enzymatischer Verdau von tierischem Eiweiß. Pepton ist die Hauptquelle für organischen Stickstoff für die wachsenden Bakterien. Nähragar enthält auch 0,3% Rinderextrakt, der wasserlösliche Substanzen enthält, die das Bakterienwachstum unterstützen, wie Vitamine, Kohlenhydrate, organische Stickstoffverbindungen und Salze. Die letzte Komponente des Nähragars ist 1,5% Agar, welches das Verfestigungsmittel ist.
So stellen Sie Nähragar her
Lösen Sie die zuvor aufgelisteten Komponenten in der gewünschten Wassermenge auf. Um 1 Liter Nähragar herzustellen, füge 5 Gramm Pepton, 3 Gramm Rindfleischextrakt und 15 Gramm Agar hinzu und stelle sicher, dass das Endvolumen dieser Mischung durch Zugabe von destilliertem Wasser 1 Liter beträgt. Erhitze diese Mischung unter Rühren, um alle Komponenten vollständig aufzulösen. Autoklaviere die gelöste Mischung bei 121 Grad Celsius für 15 Minuten im Flüssigkeitszyklus.
So putzen Sie Nähragarplatten
Nachdem der Nähragar autoklaviert wurde, lassen Sie ihn abkühlen, aber nicht erstarren. Wenn gewünscht, fügen Sie an dieser Stelle Antibiotika hinzu. Nehmen Sie die Deckel ab und verteilen Sie die entsprechende Anzahl von Petrischalen auf eine sterile Oberfläche. Im Allgemeinen wird 1 Liter Agar ungefähr 50 große Petrischalen - 100 Millimeter Durchmesser - oder 100 kleine Petrischalen - 60 Millimeter Durchmesser gießen. Zünde eine Flamme in der Nähe an, um den Bereich um die Platten herum ebenfalls steril zu halten. Beim Öffnen der Agarflasche die Öffnung durch die Flamme führen, um sie zu sterilisieren. In jede Platte Nähragar geben und die Platten auf der sterilen Oberfläche belassen, bis der Agar erstarrt ist. Ersetzen Sie den Deckel jeder Petrischale und lagern Sie die Platten in einem Kühlschrank.
Empfehlungen zum Gießen und Lagern von Platten
Füllen Sie jede Platte zu einem halben bis zu zwei Drittel voll. Versuchen Sie alle Luftblasen zu eliminieren, da diese es schwierig machen, Bakterien über die Platte zu verteilen, sobald sie erstarrt sind. Blasen können mit der Flamme geknallt werden. Agarplatten kopfüber im Kühlschrank aufbewahren. Dies verhindert, dass Kondensation auf dem Deckel der Petrischale auf den verfestigten Agar tropft. Wenn Sie Platten langfristig lagern, prüfen Sie vor dem Gebrauch, ob diese Bakterien wachsen oder trocknen.Platten mit Antibiotika sollten innerhalb von 2 Wochen nach der Zubereitung verwendet werden.